Curso de cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC): Prácticas de laboratorio y cuestiones teórico-prácticas. Parte I. Introducción y práctica de laboratorio: cálculo de la eficiencia y representación gráfica de la ecuación de van Deemter.

María Estrella Legaz González, Mara Sacristán San Cristóbal, Eva María Díaz Peña, Borja Alarcón Aguareles, Carlos Vicente Córdoba

Resumen


En el presente curso de HPLC se plantean tres prácticas de laboratorio, de la más fácil a la más compleja, publicadas en tres partes en las que el alumno trata de resolver los problemas iniciales que cualquier investigador debe plantearse a la hora de realizar un análisis cromatográfico. En la primera práctica: cálculo de la eficiencia y representación gráfica de la ecuación de van Deemter (Parte I), se calcula el flujo de fase móvil óptimo, coincidente con la menor altura equivalente de plato teórico. En la segunda práctica: análisis cuantitativo básico (Parte II), se estudia la respuesta del detector en función de la masa de analito inyectada. La obtención de ecuaciones, por regresión lineal, permite el cálculo de masas desconocidas de analitos inyectados cuando se interpola en las mismas. La tercera práctica: optimización en la separación de compuestos semejantes mediante modificación de la fase móvil (Parte III), trata de resolver la separación de una muestra patrón de seis substancias, de naturaleza semejante, en sus componentes individuales. Para ello se realizan separaciones con fases móviles isocráticas o en gradiente. El curso se completa con una serie de cuestiones teórico-prácticas (Parte IV), elaboradas a partir de separaciones reales en las que el alumno debe discutir las posibles respuestas a las preguntas que se formulan.

Palabras clave


Fase estacionaria; Fase móvil; Columna analítica; Analito; HPLC; Eficiencia; Platos teóricos; Tiempo de retención; Masa inyectada; Análisis en gradiente; Análisis isocrático;

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